Michael Berger

Titel: Charakterisierung von putativen A. niger D-Galacturonsäuretransportern in heterologen Systemen. In dieser Arbeit forschte ich an der Funktionalität von Membrantransportern aus Aspergillus niger in Saccharomyces cerevisiae und Neurospora crassa stämmen. Dabei wurden die Assays validiert und Optimiert. Es wurde vornehmlich Kloniert und Wachstums- bzw. Aufnahme-Assays der Expressionssysteme auf verschiedenen Medien durchgeführt.

In diesem Praktikum bearbeitete ich verschiedene Aufgabenstellungen im Bereich der Entwicklung pflanzlicher Käsealternativen und der Fermentation pflanzlicher Milchprodukte.

In diesem Praktikum war eine Hauptaufgabe das Klonieren von Membrantransportern aus Aspergillus niger entlang eines Golden Gate Assemblierungsschemas. Dazu gehört unter anderem die Induktion der relevanten Gene, cDNA synthese, Amplifikation von DNA-Fragmenten und Assemblierung in Plasmide und die zugehörigen Validierungsschritte zusammen mit den Methoden der Kultivierung von E. coli: - PCR - Agarose-Gelelektrophorese - KCM- basierte Transformation - Colony-PCR - Restriktionsverdau - Primerdesign

In diesem Praktikum habe ich unter anderem einen Phosphatase-Aktivitätsassay mit Arabidopsis thaliana und Marchantia polymorpha Transformanten durchgeführt. Die Methoden umfassen unter anderem: - Proteinaufreinigung cytosolischen Proteins - Bradford Assay - SDS- PAGE - Erstellung von Eichgeraden via Titrationskurven - Extraktion niedermolekularer Substanzen - Fraktionierung via HPLC - A. thaliana Protoplastenpräparation und Transfektion

Titel: Interaktionsstudien von Assemblierungsfaktoren der chloroplastidären ATP-Synthase. In dieser Arbeit wurde ein Gene of interest Mutiert um eine Protein-Protein-interaktionsdomäne zu identifizieren und mittels Yeast-2-Hybrid zu testen. Weiterhin wurde die spezifität von bestimmten Antikörpern getestet.